Reactivo ELISA para Prolactina
INFORMACIÓN GENERAL
La prolactina (PRL) es una hormona polipeptídica secretada por la glándula pituitaria anterior. La liberación de prolactina es pulsátil y está regulada por factores inhibidores y liberadores hipotalámicos. Se observan niveles elevados de prolactina durante el embarazo y el período de lactancia y posparto. Otros estados fisiológicos asociados con niveles elevados de prolactina incluyen estrés físico y emocional, sueño e hipoglucemia. La hiperprolactinemia puede causar supresión de la función gonadal. La medición de prolactina constituye una parte esencial de las investigaciones de infertilidad. En la mujer, los síntomas que pueden acompañar a la hiperprolactinemia incluyen galactorrea no puerperal, amenorrea y otros trastornos menstruales. En los hombres puede estar asociada con pérdida de libido e impotencia. Las causas patológicas de la hiperprolactinemia incluyen macro y microadenomas secretores de prolactina, hipotiroidismo e insuficiencia renal.
PRUEBAS PRINCIPALES
La prueba ELISA se realiza como un inmunoensayo indirecto de tipo sándwich en fase sólida. Los micropocillos se recubren con PRL antimonoclonal y luego se bloquean los sitios que no reaccionaron para reducir la unión no específica.
Paso 1 Los antígenos de prolactina presentes en los calibradores y las muestras de pacientes se unen al anticuerpo recubierto.
Paso 2 El complejo antígeno-anticuerpo se hace reaccionar con un conjugado de PRL antimonoclonal marcado con enzima (HRP), lo que da como resultado que el antígeno PRL quede intercalado entre el anticuerpo en fase sólida y el conjugado enzimático.
Paso 3 La enzima convierte el sustrato agregado (TMB) para formar una solución coloreada.
Paso 4 La intensidad del cambio de color, que es proporcional a la concentración de anticuerpos presentes en las muestras, se lee mediante un lector de microplacas a 450 nm. Los resultados se expresan en ng/ml.
Longitud de onda
Filtro de medición: 450/620 nm
Tiempo de incubación
80 minutos a temperatura ambiente (60/20)
Conjugado enzimático
HRP (peroxidasa de rábano picante)
Sustrato
TMB (3,3´,5,5´-tetrametil-bencidina)
Muestra
Suero o plasma
Estabilidad de las muestras
sin diluir: 2 días a 2-8 °C; para un almacenamiento más prolongado a - 20 °C
Rango de calibración
0 – 200 ng/ml
Sensibilidad
1 ng/ml
Vida útil y estabilidad de los componentes del kit
Kit: 18 meses a partir de la fecha de producción.
Componentes del kit: consulte la fecha de vencimiento en la etiqueta
COMPONENTES DEL KIT
Placas de micropocillos
12x
Tiras de 8 pocillos con micropocillos desprendibles recubiertos con PRL antimonoclonal.
Calibradores
5 viales, A 1 ml, B-E 0,15 ml, listos para usar.
Aprox. 0-5-20-75-200 ng/ml, ver etiquetas
Conjugado enzimático
1 vial de conjugado PRL-HRP antimonoclonal, 11 ml, listo para usar.
Solución de sustrato
1 vial de H2O2,TMB 0,25 g/l, 11 ml, listo para usar.
Solución de parada
1vial de ácido sulfúrico 0,15 mol/l, 11 ml, listo para usar.